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TUhjnbcbe - 2021/12/23 17:57:00
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体外重建的人体皮肤是研究UVB和UVA暴露影响的有用模型。

研究表明不同波长的紫外线可以造成重建皮肤模型特异性的生物学损伤,例如UVB照射后形成晒伤细胞(SBC)和嘧啶二聚体(CPD),在UVA暴露后皮肤成纤维细胞发生老化性改变。以这些特征性的生物学损伤为参数,可以用来评估皮肤表面局部施用防晒霜所提供的保护作用。使用场景包括:①相似配方防晒机制的比较:如相同化学防晒剂组分添加不同生物活性物质;②防晒剂原料的量效关系分析;③对复杂暴露的防护效果,如紫外线组合颗粒物和烟雾等。此外,还可以建立基于皮肤模型的体外防晒指数,用于建立人体指数预测的数学模型。其优点在于:原料、配方和产品均可测试;全层皮肤可模拟UVB和UVA损伤的基本特征性参数;操作简单。不足之处:重建皮肤对化合物的生物利用度较正常皮肤低;对重建皮肤模型的质量和批次稳定性要求极高;对于代谢活性高的化学或生物防晒剂要补充其他数据;无法体现皮肤第三种细胞的相互作用及在防晒中的作用。

本篇以具有不同吸收光谱但具有相似防晒指数的配方为例,基于皮肤模型比较防晒作用的差异。

流行病学和实验研究已证明,日光照射会导致各种有害的皮肤作用,包括晒伤、免疫抑制、皮肤癌和光老化。UVB的作用主要是晒伤皮肤引起红斑,UVA的作用主要是引起光老化。因此,精心设计有效的广谱防晒产品很受消费者欢迎。事实也证明,使用防晒产品可以很好地保护皮肤。SKH小鼠体内研究表明,防晒霜可有效防止光致癌作用或光老化。由于伦理上的原因,使用防晒霜的防癌作用、防止日晒型角化病、免疫保护作用等很难在正常人体中进行试验性评估,而且诱发此类病征所需的时间和个体差异也不允许开展临床研究。

这种情况下,体外模型的重要意义显而易见,包括细胞水平、重建全层皮肤、离体人体皮肤和动物(小型猪)皮肤。体外模型最大的优点是可以利用与阳光暴露相关的早期生物学事件作为评估防晒产品的终点。如:DNA的损伤和基因突变可作为早期皮肤UVA诱导的有害作用,它是光致癌和光老化的潜在标志。二维皮肤细胞(角质细胞、成纤维细胞、黑色素细胞)虽然实验体系简单,方法多元,但细胞培养不能充分反映生理条件,例如紫外线穿透皮肤的能力和两种以上细胞的相互作用等。

体外重建的全层人体皮肤模型由活的真皮等效物和完全分化的表皮组成,在UVB和UVA的照射下,可诱发产生波长特异的组织损伤。表皮角质形成细胞优先被UVB靶向作用,而UVA引起真皮层细胞及胞外基质(ECM)的重要改变。华代公司使用被全球化妆品行业公认的具有高质量保证的全层皮肤T-Skin(上海斯安肤诺生产),为评估防晒剂的光保护作用提供了基础。

具体实验过程还需要一个皮肤暴露舱,华代公司使用的专用光暴露舱有常见的UVA、UVB、日光,还有蓝光和红外光等多种。稳定的暴露源同样也是建立科学稳定的评价模型的基础。在防晒剂的研制中,比较了两种具有不同吸收光谱但具有相似SPF值的防晒霜,利用UVB和UVA分别照射体外重建皮肤分析引起的特定损伤的区别。一种防晒配方含有经典的UVB吸收剂,2-乙基己基-对甲氧基肉桂酸酯(2-EHMC);另一种配方含有含Mexoryl?SX,一种双亚苄基樟脑磺酸衍生物,它可吸收nm至nm之间的紫外线,被用作广谱吸收剂。在简单的水/油介质中,两种防晒剂的使用量均为5%。皮肤涂抹量为2mg/cm2。防晒机制用SBC计数和嘧啶二聚体免疫染色显示评估。结果表明,两种吸收剂在防止UVB损害方面的能力相似。但在防护UVA方面,只有含SX的防晒剂才能有效防止UVA特异性损伤,包括真皮成纤维细胞的形态变化、数量减少和ECM紊乱。结论认为:体外重建的全皮模型T-SKIN是评估不同防晒霜对特定UVB和UVA生物损伤的光保护作用的可靠系统。

(暴露光源的UVB和UVA发射光谱,用于规范和设备溯源)

(防晒产品对防止CPD形成的保护作用的评估,在暴露于UVB之后使用H3抗体对冷冻切片进行免疫荧光分析)研究表明,体外重建人体皮肤是研究和评估防晒产品对特定UVB或UVA损伤的可靠系统。具体模拟场景包括UVA,UVB,广谱,日光及其组合,可模拟急性光暴露或慢性光损伤;可用于原料开发、配方比较和产品测试,在区分具有相似防晒指数但配方不同的防晒产品的比较中特别有用;还可用于晒后修复的研究和抗光老化活性成份的评估。在皮肤模型防晒产品的测试方案中,全层皮肤模型和暴露源是最重要的两个因素,稳定可转移和被验证过的皮肤模型,以及高质量可溯源的光暴露装置是科学测试的关键。

参考文献

MuntDJ,GranaA,HulceM,etal.EffectofSimultaneousAdministrationofDihydroxyacetoneontheDiffusionofLawsoneThroughVariousInVitroSkinModels.AAPSPharmSciTech,,16,6DansoMO,vanDrongelenV,MulderA,etal.TNF-alphaandTh2cytokinesinduceatopicdermatitis-likefeaturesonepidermaldifferentiationproteinsandstratumcorneumlipidsinhumanskinequivalents.JInvestDermatol,,(7):–50.

重要活动预告:化妆品研修沙龙(第五期)皮肤模型转化*理学的应用及功效评价非标方法研讨会定于11月5日在学会东方美谷培训中心召开。

标准征求意见进行中....上海市*理学会标准化技术委员会关于《化妆品感官分析实施规范》等五项团体标准征求意见的函

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